HUGO-Light双/多特异性抗体平台以HUGO-Light全人共轻链抗体小鼠为核心载体，通过固定轻链、同时保留高度多样化的重链可变区，简化双特异性抗体的筛选开发流程，从源头解决双/多特异性抗体错配、低效、周期长的行业痛点。该品系小鼠通过在小鼠免疫球蛋白轻链基因座（Igκ、Igλ）中原位插入一种人类已重排的轻链可变区序列（如Vk1-39/Jk5）并敲除其它轻链基因，实现了无论免疫什么靶点，该小鼠免疫系统仅分泌携带同一种轻链的抗体。依托该平台可高效获得共同轻链候选抗体，动物体内免疫应答效果优异，轻重链配对逻辑简洁，且可直接适配下游各类双抗组装工艺。
基因信息
品牌全称：HUGO-Light全人共轻链抗体小鼠
品牌简称：HUGO-Light
品系背景：C57BL/6NCya
毛色：黑色、白色
用途：双/多特异性抗体、ADC、双/多特异性抗体ADC
品系特点
固定共轻链：仅表达1组人源VJ轻链，λ轻链完全敲除，杜绝错配。
免疫功能健全：B细胞发育正常，免疫效价与野生型小鼠无差异。
重链自由变异：重链可变区全人源化，保障抗体多样性与高亲和力。
天然功能保留：完整模拟体内抗体成熟，产出可直接药用的全人源序列。
免疫建议
建议免疫周龄：6–8周
饲养健康级别：SPF级（无特定病原体）
适配抗原：蛋白、mRNA-LNP、细胞抗原、难免疫/弱免疫原性靶点
HUGO-Light小鼠依托TurboKnockout技术，实现三重基因精准改造：
1. 重链改造：沿用HUGO-Mab全人源重链，可变区完整替换为人源VDJ全长序列。
2. Kappa轻链改造：原位插入1组固定人源VJ轻链，删除其余轻链可变区基因。
3. λ轻链改造：完全敲除，确保所有抗体仅使用唯一指定轻链。
HUGO-Light小鼠抗体基因结构示意图
HUGO-Light双/多特异性抗体平台可大幅简化双特异性、多特异性抗体开发流程：平台产出的全人源抗体候选分子共用一条固定人源κ通用轻链。 经平台筛选获得的靶标特异性重链，可完成重组表达与功能筛选，并依托成熟的重链异二聚化技术改构为IgG样双特异性抗体。整套工艺既能解决轻链错配难题，又可保留充足抗体多样性，支撑后续先导分子筛选与抗体工程改造。
通用轻链抗体筛选：依托HUGO-Light小鼠模型制备靶标特异性抗体，全部抗体共用固定人源κ通用轻链，搭配多样化人源重链文库。
重链筛选与分子改构：将筛选得到的重链可变区与共用人源κ轻链配对，进行重组表达，用于后续功能筛选。
双特异性抗体重组表达：通用轻链抗体搭配KiH杵臼或其他重链异二聚化技术，可实现高纯度IgG样双特异性抗体组装。
HUGO-Light双/多特异性抗体开发流程
结合重链与轻链的配对频率，挑选8个表达频率最高的Kappa轻链基因，HUGO-Light小鼠轻链仅表达一组固定的人源轻链基因VJ序列，总计构建了8种HUGO-Light单基因小鼠模型。同时赛业生物也开发了另一类模型，在小鼠轻链插入4个高频的轻链V基因及1个J基因，总计构建了2种HUGO-Light四基因小鼠模型。两类产品共计10种小鼠（见下表）。
| 共同轻链产品 | HUGO-Light单基因小鼠（1-8） | HUGO-Light四基因小鼠9 | HUGO-Light四基因小鼠10 |
|---|---|---|---|
| 物种 | C57 | C57 | C57 |
| 技术 | ES胚胎重组 | ES胚胎重组 | ES胚胎重组 |
| 重链可变区 | 全人源FL | 全人源FL | 全人源FL |
| 轻链λ | knock-out | knock-out | knock-out |
| 轻链κ V | 人源IGKV1-39、 人源IGKV3-20、 人源IGKV1-5、 人源IGKV1-33、 人源IGKV2-28、 人源IGKV4-1、 人源IGKV3-15、 人源IGKV3-11 |
IGKV1-39, 2-28, 3-20, 4-1 |
IGKV1-33, 1-5, 3-15, 3-11 |
| 轻链κ J | 人源IGKJn | 人源IGKJn | 人源IGKJn |
| 轻链κ C | mouse | mouse | mouse |
| 轻链κ 插入位点 | Kappa | Kappa | Kappa |
消除轻重链随机配对的不确定性，仅需筛选高亲和力重链（VH）；双抗正确组装率由传统25%提升至95%以上，筛选效率实现量级提升，研发周期从12–18个月缩短至6–8个月。
小鼠与共轻链双抗结构专利打包出售。无需里程碑付款，买断即享全部权益，加速药物研发进程。
HUGO-Light小鼠虽将抗体结构简化为优选的单一轻链与多样化重链的组合，但其免疫效能毫不妥协。该平台已在CD3、TCR、KLK2及STEAP1等多个公认的高难度靶点上，成功获得功能突出的候选抗体。其中，靶向CD3的候选分子已明确展现出人与食蟹猴交叉结合活性。
优质重链Binder可作标准化模块，与固定共轻链自由组合、即插即用，快速搭建双/多特异性抗体、T细胞衔接器（TCE）及血脑屏障穿梭载体等复杂分子，适配热门靶点组合构建、T细胞介导肿瘤杀伤、中枢药物高效递送等前沿研发需求。
小鼠直供模式：交付绝育抗体小鼠，抗原免疫、抗体效价检测等实验工作由客户在自有指定设施内自主完成。
一站式抗体筛选服务：提供全流程一体化服务，涵盖小鼠免疫、抗体筛选、抗体活性验证全环节。
联合开发模式：整合双方技术与资源优势，协同开发创新型抗体疗法。
取未免疫小鼠脾脏提取RNA，构建文库并测序，分析重链可变区序列多样性。结果表明HUGO-Light小鼠重链抗体可变区序列多样性丰富，且各个家族使用频率与人体中重链抗体家族使用频率类似。
HUGO-Light全人源共同轻链抗体鼠免疫效价测试数据
对小鼠脾脏、外周血T、B、NK细胞进行流式免疫分型与统计学对比。结果表明：相较于野生型小鼠，HUGO-Light小鼠脾脏B细胞（CD3-CD19+）、T细胞（CD3+CD19-）、NK细胞（CD3-CD335+）数量无显著差异。
HUGO-Light小鼠脾脏、外周血B/T/NK细胞比例正常
8种全人源共轻链抗体鼠（不含VK3-20及VK1-39）经过4次免疫后，均可以检测到高效价的免疫反应，但是个体之间存在较大差异。
HUGO-Light小鼠免疫后血清抗体滴度
针对多次跨膜蛋白等难免疫靶点，HUGO-Light小鼠适配间隔两周一次的体内mRNA-LNP 免疫方案。 免疫后针对人源蛋白抗原、过表达靶抗原CHO-K1细胞均可检测到高滴度特异性血清抗体。四轮免疫后血清滴度可达243,000–729,000，证明mRNA-LNP免疫可有效激活免疫，获得丰富B细胞库，支撑后续抗体筛选。
HUGO-Light小鼠mRNA-LNP免疫应答验证数据
选取30个分子进行抗体表达并使用表达上清进行了初筛，选择OD450＞1的13株抗体进行纯化；对13株抗体进行ELISA结合活性检测，13株抗体分子展现出明显的结合活性，且有9株EC50都在皮摩尔（10-10）水平。
HUGO-Light小鼠抗DLL3抗体发现相关数据
CD3复合物mRNA-LNP免疫HUGO-Light小鼠
CD3靶点结构复杂，是双特异性T细胞衔接器（TCE）开发难点，常规免疫难以获得具备T细胞激活活性的抗体。四轮mRNA-LNP免疫后，HUGO-Light、HUGO-Mab小鼠血清均可强效结合Jurkat细胞，两组小鼠细胞水平免疫滴度均高于1:27000。
Jurkat细胞CD3免疫血清结合滴度。实验组：HUGO-Light小鼠（L726）、HUGO-Mab 小鼠（M1506），均经四轮CD3复合物mRNA-LNP免疫。
流式平台分选CD3E特异性记忆B细胞
高通量流式单细胞分选获得超150株CD3E阳性克隆；丰富的固定轻链候选库可精准调控CD3结合亲和力，该特性是降低细胞因子释放综合征（CRS）、提升双抗肿瘤杀伤效果的关键。
抗CD3筛选流程单细胞分选与ELISA结合检测。A：B细胞富集后上样索尼流式分选，筛选 B220⁺IgD⁻IgM⁻IgG⁺表型B细胞，从中分选出CD3E抗原特异性记忆B细胞；B：抗CD3E抗体ELISA EC50统计。
候选抗体细胞水平结合活性验证
重组CD3E蛋白与细胞膜天然CD3复合物构象存在差异，使用Jurkat细胞检测更贴合体内真实结合特异性。流式结果显示：2株HUGO-Mab小鼠抗体、6株HUGO-Light小鼠抗体可强效结合高表达CD3的Jurkat细胞，对CD3E敲除Jurkat细胞无结合。
抗CD3抗体在Jurkat/CD3E敲除Jurkat细胞上的流式结合曲线。抗体4倍梯度稀释（最高600nM），与细胞孵育45 min，荧光二抗染色30 min，PBS洗涤后Cytoflex S流式仪定量检测荧光信号。
人、食蟹猴外周血交叉结合验证
将2株HUGO-Mab、6株HUGO-Light来源抗体与人、食蟹猴外周血单个核细胞（PBMC）共孵育。流式结果显示，2株 HUGO-Light通用轻链抗体可同时结合人源与食蟹猴PBMC，满足临床前动物交叉验证需求。
抗CD3通用轻链抗体结合人、食蟹猴 PBMC荧光强度曲线。